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Un'innovazione importante, un sistema che funziona sempre al primo colpo.
- è un sistema Premixed di Acrilamide, BisAcrilamide, tampone e SDS
- disponibile in varie % (5,7- 5 -10 -12,5 e 15%) di acrilamide conf. da 100 o 500ml
- valido sostituto di Laemelli-SDS-PAGE
- Stabile a temperatura ambiente (1 anno!)
- Risolve bande 14.2 KDa da 14.4 sul minigel senza gradiente
- Separa proteine da 3.5 KDa e 212 KDa sullo stesso gel
- Non richiede lo stacking gel, facilità estrema d'uso (aggiungere TEMED e APS
sono le uniche operazioni da farsi)
- Risoluzione superiore a molti precast gel, ma molto più economico
- Compatibile per WesternBlotting, N-Terminal Sequencing, MS, Maldi ecc
Una soluzione pronta all'uso di acrilamide, bisacrilamide, tampone e SDS che permette una risoluzione ultra-fine di bande proteiche superiore ad ogni prodotti oggi in commercio.
La matrice, unica, del NextGel ritarda la progressione delle proteine, eliminando la necessità del gel di stacking. Quindi, non solo risparmiamo tempo, ma permette alle proteine di correre maggiormente sulla superficie del gel, incrementando la risoluzione.
La chimica proprietaria di Amresco, lavora come se fosse un gradiente, permettendo la separazione di piccoli peptidi e proteine ad alto peso molecolare sullo stesso gel
La riproducibilità è assicurata, viene consigliato sia per le analisi critiche di proteine, che per la routine. Il sistema è completamente compatibile con applicazioni SDS-PAGE standard, come 1D e 2D gels, Western Blot transfer, protein sequenceng, MALDI analysis e tutti i metodi comuni di colorazione
Protocollo
1) Scelta del NextGel da utilizzare
2) Aggiungere APS e TEMED
- 6 ul di TEMED
- 60 ul di una sol 10% APS fresca
- miscelare immediatamente e travasare tra i supporti
3) inserire il pettine, assemblare, preparare il running buffer 1X dalla confezione 20X e applicarlo alle due camere di anodo e catodo
- preparare gli standard di peso molecolare
4) far correre il gel a 200 Volts per 1 ora o sino a che la traccia non raggiunge la fine del gel
5) rimuovere il gel e colorare usando 0,1% comassie in 50% metanolo/10% ac.acetico per 30 min
- decolorare usando 50% metanolo/10% ac.acetico per 15 minuti, e poi 12,5% metanolo/2,5% ac.acetico da 30 minuti a overnight
Cosa serve per l'analisi elettroforetica?
- 20x Next Gel Buffer (fornito)
- 4x Next Gel Sample buffer (forniti) con SDS e mercaptoetanolo
- Bagno ad acqua 95-100 °C
- Supporti vetro o plastica
- Equipaggiamento per l'elettroforesi (mini o maxi) con il casting stand
- Generatore di corrente
- Soluzione colorante e decolorante
- Agitatore
Domande ricorrenti
| Posso fare gel grandi con il nextGel? |
Assolutamente SI |
| Posso usare NextGel per elettroforesi bidimensionale 2D? |
Assolutamente SI |
| Posso utilizzare altri Running Buffer oltre al vostro? |
NO, attenzione !!! |
| deve essere usato il Running Buffer Amresco, dato che fa parte del nuovo sistema. Ogni Next Gel KIT contiene il proprio RUNNING BUFFER 20X |
| Posso usare tamponi di trasferimento standard per WesternBlot? |
Si, nessun problema |
| Perchè il gel è caldo a fine corsa? |
Più voltaggio si usa più il gelò si scalda |
| Perchè il tampone cambia colore dopo alcuni mesi? |
I componenti sono sensibili al calore e alla luce, ma il viraggio non cambia le prestazioni |
| Posso usare Next Gel per Native Proteins? |
No, attenzione, contiene SDS che è un denaturante |
Elenco prodotti disponibili:
| Prodotto |
Codice |
Conf. |
NEXT GEL 5% KDa 30 - 500 ::: FINE KDa 50 - 200
Include il running buffer |
M254-100ml
M254-500ml |
100ml
500ml |
NEXT GEL 7,5% KDa 20 -3500 ::: FINE KDa 20 - 100
Include il running buffer |
M255-100ml
M255-500ml |
100ml
500ml |
NEXT GEL 10% KDa 10 - 200 ::: FINE KDa 15 - 70
Include il running buffer |
M256-100ml
M256-500ml |
100ml
500ml |
NEXT GEL 12,5% KDa 3,5 - 100 ::: FINE KDa 10 - 50
Include il running buffer |
M257-100ml
M257-500ml |
100ml
500ml |
NEXT GEL 15% KDa 2,5 - 100 ::: FINE KDa 5 - 40
Include il running buffer |
M258-100ml
M258-500ml |
100ml
500ml |
NEXT GEL Trial Kit
Include 30ml di NextGel Concentration, 250ml running buffer, 1ml sampling loading buffer |
M261-kit
(chiedere) |
1 kit |
Native NEXT GEL Kit
for non-denaturing protein work |
M271-kit |
1 kit |
LP-NEXT GEL Kit
per le grandi proteine |
M-272-kit |
1 kit |
HTS NEXT GEL Kit
per processare più di 200 campioni in un ora |
M-273-kit |
1 kit |
 Scarica la brochure dei Next gel
 Scarica il filmato esplicativo del Next Gel
Trouble shooting
| Riscaldamento del gel troppo elevato |
Ridurre voltaggio del 25% |
| Risoluzione bande ridotta |
- Ridurre la quantità di campione
- Far correre il gel più lentamente
- Ridurre quantità di sali nel campione
- Provare un gel a diversa conc. |
| Bande non precise |
- Dimuire voltaggio nei primi 15 min del 25%
- Ridurre quantità di sali nel campione
- Ridurre quantità di proteina nel campione |
| Nessuna banda o alto background |
- procedura colorazione / decolorazione non completata oppure troppo prolungata |
| Bassi pesi molecolari non visibili o diffusi |
- < 10 KDa sono difficili da fissare in un gel, aggiungere una fixing o staining solurion immediatamente dopo la corsa del gel. Non sciaquare il gel in acqua o in tampone prima della procedura di colorazione o trasferimento |
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