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Purificazione con proteina A e G
KPL vi offre i kit (e le sostanze contenute separatamente), per isolare in modo veloce ed efficiente un'ampia varietà di immunoglobuline di molte specie di mammiferi; i kits contengono tutto il necessario per la purificazione:
Protein G Agarose è proteina G ricombinante prodotta in E. coli; dopo purificazione è immobilizzata con un legame covalente su agarosio cross-linked (4%). Viene utilizzata per l'isolamento di anticorpi IgG antibodies utilizzando coloninne o metodi di immunoprecipitazione. La sequenza di DNA di proteina G nativa ( Streptococcal group G) rivela due domini IgG-binding, come per l'albumina e cell surface binding (1 - 6). Per ridurre la non specificità, questi ultimi domini di legame (albumina e cell-surface) sono stati eliminati, mantenendo un'alta efficienza della regione Fc delle IgG. La proteina G può essere pertanto utilizzata con profitto per separare l'albumina dalle IgG umane crude.
| Kit Proteina A e Proteina G |
| Benefit |
Kit completo, acquistate tutto ciò che è necessario per la vostra purificazione |
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Sistema tamponi ottimizzato per il massimo delle performances |
| Conveninete: i tamponi sono in forma concentrata |
| Conveniente: la rigenerazione delle colonne è semplice e veloce |
| Flessibile: la resina puo' essere utilizzata "a gravità" o con sistemi automatizzati |
| Perchè il Kit? I sistemi tampone nei kit sono ottimizzati per poter ottenere la massima efficienza dalla purificazione, tuttavia è possibile acquistare anche la proteina A e G supportate separatamente (Proteina A su Agarosio Codice 223-50-01, Proteina G su Agarosio Codice 223-51-01). I kit si mantengono a 2°-8° C e sono stabili per almeno 1 anno dalla data di ricevimento. |
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| Procedura Kit Proteina A e Proteina G |
| Preparazione del campione |
Diluizione del serum, fuido ascita o fuido terr coltura
nel tampone di binding/lavaggio |
| Applicazione del campione in coloninna |
| Lavaggo colonnina |
| Eluizione Ig |
| Rigenerazione della colonna |
| Contenuto: |
- colonnine disposable
- tampone di binding e lavaggio
- tampone di diluizione
- tampone di mantenimento |
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| Kit per Immunoprecipitazione |
| Benefit |
Kit completo, acquistate tutto ciò che è necessario per la vostra purificazione |
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Conveninete: tutto è fornito a parte l'anticorpo specifico) |
| Perdite minime: Il cocktail di inibizione della proteasi minimizza la perdita della proteina target. |
| Flessibile: Il contenuto del tampose lisante e della soluzione di lavaggio possono essere modificati per una specifica proteina |
| Perchè il kit?
Ottenete tutti i reagenti necessari (a parte l'anticorpo specifico) ottimizzati per ottenere il massimo dalla vostra purificazione, con il minimo di perdita della proteina target |
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| Procedura Kit per Immunoprecipitazione |
- Lisi cellulare e solubilizzazione dell'antigene 30 min |
- Micocentrifugazione 10 min |
- Preclear 60 min |
- Immunoprecipitazione e aggiunta fase solida 90 min - overnight |
- lavaggio 5 min |
# Test attività enzima, oppure: |
- Risospensione ed eluizione 2 min |
- Rimozione fase solida 1 min |
- Aggiunta agente riducente e riscaldamento 2 min |
# SDS-Page e western blottin |
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